非洲猪瘟（African Swine Fever, ASF）是一种由非洲猪瘟病毒（ASFV）引起的急性、高度接触性传染病，对家猪和野猪具有极强的致死性。自2018年以来，ASF在全球范围内快速传播，给生猪养殖业造成了数千亿元的经济损失。由于其高传染性、缺乏有效疫苗以及病毒在环境中存活能力强等特点，ASF的防控核心在于早期发现和精准检测。通过科学规范的检测技术，能够有效阻断病毒传播链，降低疫情扩散风险。因此，建立完善的检测体系成为各国动物疫病防控的重点任务。
ASF检测项目需覆盖病毒存在的不同阶段和样本类型，主要包括以下几类：
1. 病毒抗原检测：通过检测病猪组织（如脾脏、淋巴结）、血液或分泌物中的病毒蛋白，适用于急性感染期的快速诊断。
2. 病毒核酸检测：针对ASFV的DNA进行检测，具有高灵敏度和特异性，可识别潜伏期感染。
3. 抗体检测：通过检测猪群血清中的特异性抗体（IgG/IgM），用于追溯感染史和群体免疫状况监测。
4. 环境样本检测：包括饲料、运输工具、养殖场设施等，评估病毒污染风险。
根据检测目标的不同，主要采用以下技术手段：
1. PCR检测法：
• 常规PCR：通过扩增病毒保守基因片段（如B646L/P72基因）进行定性分析
• 实时荧光定量PCR（qPCR）：可定量检测病毒载量，灵敏度达1-10拷贝/μL
2. ELISA检测法：
• 间接ELISA：检测血清抗体，适用于大规模筛查
• 阻断ELISA：可区分疫苗抗体与野毒感染抗体
3. 病毒分离培养：
使用猪肺泡巨噬细胞（PAM）或Vero细胞进行病毒培养，作为确诊的"金标准"
4. 侧流免疫层析法（LFIA）：
快速检测试纸条可在15分钟内完成现场初筛
全球通行的检测标准体系包括：
1. OIE标准：
《陆生动物诊断试验和疫苗手册》详细规定了ASF病毒分离、PCR、ELISA等方法的技术要求。
2. 中国国家标准：
• GB/T 18648-2020《非洲猪瘟诊断技术》规范了临床诊断与实验室检测流程
• 农业农村部《非洲猪瘟疫情应急实施方案》明确采样、检测及结果判定标准
3. 欧盟标准：
COMMISSION IMPLEMENTING REGULATION (EU) 2021/605规定成员国实验室检测能力验证要求
关键指标要求：
• PCR检测灵敏度≥95%，特异性≥98%
• 抗体检测窗口期覆盖感染后7-21天
• 检测试剂需通过OIE参考实验室验证
